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HPLC法测定麦杞西洋参饮料中人参皂苷Rb1的含量

发布时间:2022-03-15 08:41:34 浏览数:

【摘要】 目的 建立此种麦杞西洋参饮料中人参皂苷Rb1的含量测定方法。方法 HPLC法。流动相:乙腈-水-磷酸(28:72:0.1)。检测波长为203nm;柱温40℃。结果 人参皂苷Rb1含量在0.4695-2.3476mg/ml之间呈良好线性,平均回收率为98.0%,RSD=1.7%(n=5)。结论 方法可靠,简单可行,为控制麦杞西洋参饮料的内在质量提供了科学依据。

【关键词】 麦杞西洋参饮料:西洋参;人参皂苷Rb1;HPLC法

doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2012.08.547 文章编号:1004-7484(2012)-08-2852-01

麦杞西洋参饮料以西洋参为主要原料,经过科学工艺制成,具有缓解体力疲劳的保健功能。为更好地控制其内在质量,确保其质量稳定可靠,我们以HPLC法测定了本品中的主要有效成分西洋参中人参皂苷Rb1的含量,为控制其质量提供科学依据。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪:安捷伦1200高效液相色谱仪;天平:分析天平十万分之一XS-205;人参皂苷Rb1对照品:中国药品生物制品检定所;麦杞西洋参饮料样品:吉林省集安益盛药业股份有限公司。所用试剂甲醇、乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:安捷伦C18;流动相:乙腈-水-磷酸(28:72:0.1);检测波长:203nm;柱温:40℃;流速:1ml/min;进样量:10ul;理论板数:理论板数按人参皂苷Rb1峰计算不应低于1800。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rb1对照品25mg,置于25ml量瓶中,加50%甲醇溶解稀释至刻度,摇匀,作对照品液(每1ml中含人参皂苷Rb11mg)。

2.3 供试品溶液的制备 精密量取本品50ml,加0.1mol/L氢氧化钠溶液调节PH值至12,用水饱和正丁醇溶液振摇提取3次,每次25ml,合并提取液,置水浴上蒸干,残渣加50%甲醇溶解至5ml量瓶中并稀释至刻度,作为供试品溶液。

2.4 阴性对照溶液的制备 按处方组成,取出西洋参外的其余药,按制备工艺要求,制成不含西洋参的阴性对照样品,再按供试品溶液的制备方法,制成阴性对照溶液。

2.5 空白试验 按上述条件,分别吸取供试品溶液、对照品溶液,阴性对照品溶液适量,分别注入液相色谱仪测定,结果其它成分对人参皂苷Rb1的测定无干扰,符合测定要求,详细结果,见下图:

2.6 线性关系考察 精密称取人参皂苷Rb1对照品0.05869g,置25ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,作对照品溶液(每1ml中含人参皂苷Rb12mg)。从对照品溶液中精密吸取溶液2、4、5、6、8ml,分别置10ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀。分别精密吸取上述溶液及对照品溶液各10ul,注入液相色谱分析仪分析,以峰面积为纵坐标,以人参皂苷Rb1浓度为横坐标,得回归方程为:A=2011.7C-3.0445,r=0.9999(n=6),结果表明:人参皂苷Rb1对照品在所试浓度0.4695-2.3476mg/ml范围内具良好的线性关系,详细结果,见表1。

2.7 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液,连续进样6次,进行精密度试验,其 =2577.68,RSD=0.3875%(n=6)。结果表明仪器具有良好的精密度,详细结果,见表2。

2.8 稳定性考察 精密吸取同一样品,照2.3方法制备测定,考察0、2、4、6、8小时时峰面积的变化,结果8小时内稳定性良好,其 =2349.23,RSD=0.5838%(n=5),详细结果,见表3。

2.9 重现性考察 精密吸取同一批样品6份,照2.3方法制备,独立试验,结果平均含量为11.7mg/100ml,其RSD=1.3378%(n=6)。表明重现性良好,详细结果,见表4。

2.10 回收率试验 取已知含量(11.7mg/100ml)样品5份,分别精密量取25ml,分别精密加入人参皂苷Rb1对照品溶液(0.1224mg/ml)25ml,按供试品溶液的制备方法制成检测溶液,并依法测定,详细结果,见表5。其平均回收率为98.02%,RSD=1.7207%(n=5)。

3 讨论

本研究采用高效液相色谱法,选用人参皂苷Rb1为标示性成分,对麦杞西洋参饮料中西洋参的有效成分之一人参皂苷Rb1进行含量测定。并分别对线性关系,精密度,稳定性,重现性和回收率进行了考察。试验结果表明所建立的方法稳定、准确、可行,能有效地控制麦杞西洋参饮料的内在质量。

参考文献

[1] 《中华人民共和国药典》2010版西洋参项下含量测定.

[2] 陈军辉,等.12种西洋参中总皂苷及人参皂苷Rb1的测定比较.时珍国医国药,2005,16(9):845-847.

[3] 中华人民共和国农业行业标准NY 316-1997项下人参皂甙Rb1含量的测定方法.

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